【虫生真菌干菌丝生产的研究 ⅰ.干燥、粉碎和贮藏对新蚜虫疠霉干菌丝活力的影响-国际云顶yd4008

(二)干菌丝制备

1.摇瓶培养每600m1 培养液中接入2只平板菌种。培养液配方为:葡萄糖1.6% (w/v) ,静母浸出粉1% (w/v) ,半脱脂牛奶10% (v/v)。15磅下灭菌25分钟。将平板菌种用打孔器切成直径8mm的小圆片，接入盛有600m1增养液的1000m1无菌烧杯,用匀浆机匀浆(打碎菌丝)。匀浆机的轴叶部分应事先卸下灭菌。每只250m1三角烧瓶分装35m1接种过的培养液，置于旋转式摇床18c下培养，摇床转速控制在100r/m，培养120小时。

2.发酵罐培养使用10l的，上盖通气玻璃发酵罐，罐体置于磁力搅拌机之上，罐底放有磁棒，通气培养时保持搅拌以防菌丝沉积并减少缠绕。罐底与搅拌机之间安放一泡沫塑料板，防止罐底受热。发酵罐与空气泵接通处(进气口)及排气管口皆安装细菌过滤器过滤空气，进气口2只，排气口1只。罐内装有8l培养液，配方为1.6%葡萄糖(w/v)、1%酶母浸出粉(w/v)、5%半脱脂牛奶(v/v)。15磅下灭菌60分钟。将560m1摇瓶培养物(35m1x16瓶)倒入无菌烧杯中用匀浆机匀浆，倒入无菌菌种瓶(广口瓶，其橡皮塞上接一玻璃管，管外连通耐高压灭菌的塑料软管)中,并加入40m1青霉素一链霉素一新霉素合剂(si-gma公司产)，每m1含25 0单位青霉素，0. 25mg链霉素和0.5mg新霉素，然后以负压吸入发酵罐中。接种后在室温(21 士4c)下通气培养96小时(第1批) 和144小时(第二批)。